在自然界中遭受食草動物攻擊時，除了依靠莖葉毛、刺等第一道物理屏障外，植物還依賴于激素水平的變化或某些信號物質的釋放，參與化學誘導的防御攻擊。1 ]。迄今為止，研究表明水楊酸、茉莉酸等植物激素及其甲基化產(chǎn)物在植物防御信號的傳遞中具有非常重要的作用[ 2]。水楊酸在植物中發(fā)揮著多種生理作用，許多實驗證明它是系統(tǒng)獲得性抗性產(chǎn)生的關鍵信號分子之一。茉莉酸廣泛存在于高等植物中，是一種新型植物激素，可使植物產(chǎn)生多種形態(tài)或生理效應。其作用是誘導糯花的開放和塊莖的形成[ 3 ]，抑制花粉萌發(fā)、根系生長等[ 4 ]。此外，當植物受到病原體或食草動物的攻擊時，茉莉酸可以通過改變內(nèi)源水平來誘導植物啟動防御系統(tǒng)[ 5]。作為內(nèi)源性信號分子，其生理效應在植物中極為復雜，因此建立一種穩(wěn)定、靈敏的內(nèi)源性信號化合物測定方法具有重要意義。

植物中水楊酸和茉莉酸的含量很低，測定起來很困難。隨著分離鑒定技術的發(fā)展，我們的前人已將多種方法應用于植物中信號化合物的測定。目前，測定水楊酸和茉莉酸的主要方法有ELISA、HPLC和UPLC[ 6 ]。采用ELISA的方法，樣品中的水楊酸和茉莉酸得到較好的富集，然后進行色譜分析。這樣，樣品的回收率更高。但單克隆抗體生產(chǎn)難度大，不易推廣。此外，結合三重四極桿質譜儀 [ 7 – 10]、飛行時間質譜儀和熒光檢測器 [ 11 , 12 ]，HPLC 可以同時測量茉莉酸和水楊酸的含量。張等人。用毛細管電泳激光誘導熒光檢測法測定了巴西橡膠樹皮提取物中茉莉酸的含量[ 13 ]。但該方法需要對不含熒光發(fā)射基團的茉莉酸進行熒光衍生化處理，分析過程較為繁瑣。GC-MS 用于化合物分析的優(yōu)點是經(jīng)過簡單分離后無需推導即可直接測量。

據(jù)我們所知，尚未報道榆樹葉的信號化合物水平的測量。本文建立了提取、純化和GC-MS測定的方法。此外，測定了四葉草 Sasaki對短尾楓葉攻擊后不同時期信號化合物的含量，并分析了它們的變化。本研究的目的是揭示在癭形成過程中寄主U. pumila葉片內(nèi)源茉莉酸和水楊酸水平的變化趨勢。

實驗
茉莉酸、水楊酸、水楊酸甲酯、茉莉酸甲酯、二氫茉莉酸（內(nèi)標，IS）、伯仲胺、石墨化炭黑購自德國sigma公司，純度高于98.5%。